獲思茅地區(qū)科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)

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云南省瘧疾防治研究所

 

云南省是我國(guó)惡性瘧流行的主要地區(qū)之一，惡性瘧流行分布面廣，特別是與緬甸、老撾接壤的邊境縣，惡性瘧流行更為嚴(yán)重，隨著抗瘧工作的不斷深入， 抗氫喹惡性瘧原蟲的分布日趨擴(kuò)散，不僅抗性率高（85%以上）且抗性程度均在不斷上升，嚴(yán)重地阻礙了滅瘧工作的進(jìn)展。為研究氯喹抗藥性的藥物配伍，篩選新的抗瘧藥及免疫診斷提供同種抗原的需要，于1983年7月在思茅當(dāng)?shù)赜梢幻麗盒辕懟颊哐蟹蛛x外一株惡性瘧原蟲，按照Trager等的蠟燭缸法進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)液采用RPMI1640培養(yǎng)液加人血清培養(yǎng)， 起始原蟲感染率為1%，經(jīng)培養(yǎng)20小時(shí)后原蟲發(fā)育為滋養(yǎng)體和裂殖體，第5天密度明顯上升并作兩次稀釋。20天出現(xiàn)死蟲，原蟲率下降，但瘧原蟲形態(tài)正常， 仍可查見(jiàn)少量裂殖體。第31天取一皿采用免血清與人AB血清同時(shí)培養(yǎng)，原蟲寄生率分別為3.3%、3.2%，用人血清第40天原蟲平均寄生率為1.4%、50天為0.35%，60 天上升，開(kāi)始上升為5. 5%，70天達(dá)9.4%；使用免血清原蟲寄生率一直在較低水平，70天為零，90天才開(kāi)始上升至3.6%，120天達(dá)6%。，連續(xù)培養(yǎng)15天和64天的培養(yǎng)物放入液氯冰凍6-79天， 復(fù)蘇培養(yǎng)反復(fù)4次均獲得成功，原蟲生長(zhǎng)良好，寄生率達(dá)20%左右。在103─201天經(jīng)反復(fù)冰凍復(fù)蘇培養(yǎng),作了6次體外微測(cè)，（氯喹測(cè)定板由中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院上海寄生蟲病研究所提供）按氯喹抗性標(biāo)準(zhǔn)判定屬抗氯喹惡性瘧原蟲株。

馴化一株惡性瘧原蟲使其適應(yīng)體外培養(yǎng)環(huán)境，并能迅速發(fā)育繁殖，需要兩個(gè)月左右的時(shí)間才能穩(wěn)定， 為了證實(shí)本株惡性瘧已適應(yīng)體外培養(yǎng)將培養(yǎng)物反復(fù)冷凍多次均顯示原蟲率能迅速上升，且原蟲寄生率達(dá)20%。與北京、上海生物研究所和第二軍大的體外連續(xù)培養(yǎng)的寄生率相似。此株惡性瘧原蟲抗性株的培養(yǎng)成功將對(duì)研究氯喹抗性的藥物配伍及篩選新抗瘧藥物提供蟲源，在我省首次建立了惡性瘧抗性株原蟲。

 

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